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液相中, 加入不同濃度CIP的SBR反應器運行穩定后, 取適量出水在4 ℃、4000 r · min-1條件下離心10 min, 取上清液, 過0.45 μm濾膜, 然后過HLB固相萃取小柱凈化富集.HLB萃取小柱在使用前依次用10 mL高純水和10 mL甲醇進行活化.將濾液加入已活化的萃取小柱, 控制上樣速度為2 mL · min-1, 上樣完畢, 用20 mL高純水淋洗萃取柱后靜置10 min, 氮氣吹掃柱子30 min, 用12 mL的甲醇:乙腈(1 : 1, V/V)溶液洗脫小柱, 收集洗脫液, 并將其在40 ℃水浴下用氮氣吹至近干;然后用色譜甲醇-高純水(60 : 40, V/V)定容至1 mL, 振蕩混勻, 過0.22 μm濾膜, 處理好的樣品密封避光儲存在-20 ℃的環境下, 待測(何勢, 2016;戴琦, 2017).
固相中, 污泥樣品需進行下述準備:凍干的污泥樣品首先放入塑料離心管內, 每一根離心管內加入10 mL 5%的甲醇溶液, 使用漩渦混合器混合1 min, 在50 ℃的條件下超聲處理5 min;隨后將樣品放入離心機在轉速為4000 r · min-1的條件下離心處理5 min, 將上層清液轉移到離心管內, 重復上述步驟處理底部的剩余殘渣, 并將多次處理后的上清液混合.取10 mL提取液在50 ℃的微弱氮氣條件下吹至近干, 剩余物用1 mL流動相溶解, 溶液使用0.22 μm有機濾膜過濾到2 mL采樣瓶內, 待測(Zhang et al., 2014; 戴琦, 2017).
CIP濃度采用液相色譜儀HPLC(LC-2010A型, 日本島津)測定, 色譜柱為ODS-2(5 μm 4.6 nm×250 mm, WondaCract, 日本島津), 檢測器為紫外可見吸收檢測器(UV-Vis), 波長為277 nm, 流動相為色譜純乙腈:水(含0.1%甲酸, 色譜純)=20 : 80(體積比), 流速為0.7 mL · min-1, 溫度為35 ℃, 進樣體積為10 μL, 根據峰面積計算出其含量.
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